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聚肽HVLPs的制备与载药性能

王红权 续文恒 张朔 姜翔宇 李慧 陈家琛 蔡春华 林嘉平

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聚肽HVLPs的制备与载药性能

    作者简介: 王红权(1993-),男,硕士生,主要研究方向为聚肽自组装。E-mail:thinkwhq@163.com.
    通讯作者: 蔡春华, caichunhua@ecust.edu.cn ; 林嘉平, jlin@ecust.edu.cn
  • 中图分类号: O63

Polypeptide-based Hollow Virus-like Particles: Preparation and Drug-loading Property

    Corresponding author: CAI Chunhua, caichunhua@ecust.edu.cn ;LIN Jiaping, jlin@ecust.edu.cn
  • CLC number: O63

  • 摘要: 通过脱苄基和酯化反应,在聚(γ-苄基L-谷氨酸酯)-b-聚乙二醇(PBLG-b-PEG)嵌段共聚物的PBLG嵌段侧基修饰上可光交联的肉桂酰氧基,得到聚(γ-苄基L-谷氨酸酯-co-肉桂基L-谷氨酸酯)-b-聚乙二醇(P(BLG/CLG)-b-PEG)嵌段共聚物。将P(BLG/CLG)-b-PEG分别与PBLG均聚物、聚苯乙烯(PS)均聚物共混自组装,制备出具有核-壳结构的棒状和球状VLPs(VLPs):其中,均聚物形成棒状或球状内核,嵌段共聚物构成外壳。利用紫外光照射交联CLG链段固定VLPs壳结构,以N,N′-二甲基甲酰胺(DMF)溶解去除均聚物内核,制备HVLPs(HVLPs)。采用扫描电镜、透射电镜表征了组装体的微观形貌。研究表明:DMF可以溶解去除球状VLPs的PS均聚物内核,制备出表面具有条纹的球状HVLPs;而棒状VLPs的PBLG均聚物内核不能被DMF溶解去除。以阿霉素(DOX)为模型药物,研究了球状HVLPs的载药性能,其对DOX的相对载药量可以达到230 %,在pH = 7.4时72 h药物累计释放量达到80 %。
  • 图 1  可光交联的P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物的合成过程

    Figure 1.  Synthetic route of photo-crosslinkable P(BLG/CLG)-b-PEG block copolymer

    图 2  样品的1H-NMR谱图

    Figure 2.  1H-NMR spectra of samples

    图 3  P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物[2+2]环加成反应示意图(a);P(BLG/CLG)-b-PEG聚集体的紫外光照射时间-紫外吸收光谱图(b);At/A0与紫外光照射时间的关系图(c);P(BLG/CLG)-b-PEG紫外光照射前后红外光谱图(紫外光照射40 min)(d);P(BLG/CLG)-b-PEG交联前后的1H-NMR谱图(紫外光照射40 min)(e)

    Figure 3.  Schematic illustration of [2 + 2] cycloaddition reaction of P(BLG/CLG)-b-PEG copolymer(a); UV-Vis spectra of aqueous solution of P(BLG/CLG)-b-PEG aggregates subjected to UV-irradiation at 254 nm as a function of irradiation time(b); Plot of At/A0 at 293 nm against irradiation time(c); FT-IR(d)and 1H-NMR(e)spectra of P(BLG/CLG)-b-PEG before and after UV-irradiation for 40 min

    图 4  SEM表征P(BLG/CLG)-b-PEG/均聚物共混自组装形成的聚集体形貌:交联前(a)后(b)球状VLPs;球状HVLPs的SEM图(c)和TEM图(d);交联前(e)后(f)棒状VLPs

    Figure 4.  SEM images of aggregates formed by P(BLG/CLG)-b-PEG/homopolymer mixtures: Spherical VLPs before(a)and after(b)UV-irradiation; Typical SEM(c)and TEM(d)images of spherical HVLPs; Rod-like VLPs before(e)and after(f)UV-irradiation

    图 5  DOX在DMF-H2O(体积比为4/1)溶剂中的紫外吸收光谱(a);DOX在DMF-H2O(体积比为4/1)溶剂中吸光度和质量浓度关系的标准曲线(485 nm)(b);VLPs的相对载药量和包封率与投药量的关系曲线(c);在fDOX = 0.83条件下制得的载药VLPs的药物缓释曲线(d)

    Figure 5.  UV-Vis spectrum of DOX in DMF-H2O(Volume ratio 4/1)(a); Concentration-absorbance profile of DOX in DMF-H2O(Volume ratio 4/1)(b); Plots of drug-loading content and encapsulation percentage of DOX-loaded VLPs as a function of fDOX(c); Drug release of DOX from drug-loaded VLPs prepared with fDOX = 0.83(d)

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出版历程
  • 收稿日期:  2019-04-24
  • 网络出版日期:  2019-10-16

聚肽HVLPs的制备与载药性能

    通讯作者: 蔡春华, caichunhua@ecust.edu.cn
    通讯作者: 林嘉平, jlin@ecust.edu.cn
    作者简介: 王红权(1993-),男,硕士生,主要研究方向为聚肽自组装。E-mail:thinkwhq@163.com
  • 华东理工大学材料科学与工程学院,上海市先进聚合物材料重点实验室,上海 200237

摘要: 通过脱苄基和酯化反应,在聚(γ-苄基L-谷氨酸酯)-b-聚乙二醇(PBLG-b-PEG)嵌段共聚物的PBLG嵌段侧基修饰上可光交联的肉桂酰氧基,得到聚(γ-苄基L-谷氨酸酯-co-肉桂基L-谷氨酸酯)-b-聚乙二醇(P(BLG/CLG)-b-PEG)嵌段共聚物。将P(BLG/CLG)-b-PEG分别与PBLG均聚物、聚苯乙烯(PS)均聚物共混自组装,制备出具有核-壳结构的棒状和球状VLPs(VLPs):其中,均聚物形成棒状或球状内核,嵌段共聚物构成外壳。利用紫外光照射交联CLG链段固定VLPs壳结构,以N,N′-二甲基甲酰胺(DMF)溶解去除均聚物内核,制备HVLPs(HVLPs)。采用扫描电镜、透射电镜表征了组装体的微观形貌。研究表明:DMF可以溶解去除球状VLPs的PS均聚物内核,制备出表面具有条纹的球状HVLPs;而棒状VLPs的PBLG均聚物内核不能被DMF溶解去除。以阿霉素(DOX)为模型药物,研究了球状HVLPs的载药性能,其对DOX的相对载药量可以达到230 %,在pH = 7.4时72 h药物累计释放量达到80 %。

English Abstract

  • 自然界中的病毒以DNA或RNA为核,蛋白质在外层有序排列形成衣壳。病毒的衣壳蛋白质通常形成规整有序的表面纳米结构,这些结构使病毒表现出高效的细胞内化能力[1]。模仿病毒的结构特征,人们通过聚合物自组装构建了一系列的VLPs(VLPs),这些VLPs在药物载体、基因工程等领域具有广阔的应用前景[2, 3]。聚肽由氨基酸构成,具有良好的生物相容性;聚肽共聚物可以自组装形成形貌丰富的结构,在构筑VLPs方面具有独特的优势[4-6]。近期,本课题组发现聚(γ-苄基L-谷氨酸酯)-b-聚乙二醇(PBLG-b-PEG)嵌段共聚物与PBLG均聚物或聚苯乙烯(PS)均聚物共混自组装,可以形成棒状或球状VLPs[7-9]:均聚物形成棒状或球状内核,嵌段共聚物构成外壳,并有序排列形成规整的表面纳米结构。这些聚集体的形态、结构与天然病毒相似,可以作为仿病毒材料开展性能研究[10]

    中空纳米粒子具有高负载特性,在药物释控、催化等领域具有广泛的应用与研究价值[11-13]。模板法是制备中空纳米粒子的常用方法[14, 15]。制备过程常以交联或者聚合的方式固定壳结构,经溶剂溶解除去模板后得到中空纳米粒子,这种方法简单高效、纳米粒子的结构可调控性强[16]。目前,已报道的利用模板法制备的中空纳米粒子通常缺乏规整的表面纳米结构。

    本文基于聚肽共聚物自组装,制备了一种具有规整表面纳米结构的HVLPs(HVLPs),并研究了其载药性能。利用聚(γ-苄基L-谷氨酸酯-co-肉桂基L-谷氨酸酯)-b-聚乙二醇(P(BLG/CLG)-b-PEG)嵌段共聚物与PBLG均聚物或PS均聚物共混自组装,形成具有核-壳结构的棒状或球状VLPs(其中均聚物构成内核,嵌段共聚物构成外壳并形成有序纳米结构);通过紫外光照射交联VLPs壳层中肉桂酰氧基上的碳碳双键固定壳层纳米结构,并用N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶解球状VLPs的PS均聚物内核,制备出表面具有条纹的球状HVLPs。以阿霉素(DOX)为模型药物,研究了球状HVLPs对DOX的负载和释放性能。本研究为制备具有规整表面纳米结构的HVLPs提供了新策略,所制备的表面带有条纹的HVLPs有望在药物载体等领域得到应用。

    • PBLG-b-PEG嵌段共聚物:PBLG链段Mn= 3.0×104,聚合度为137,PEG链段Mn = 5.0×103,聚合度为113,Mw/Mn = 1.12,自制[17];PBLG均聚物:Mn= 1.7×105Mw/Mn = 1.23,自制[18];PS均聚物,Mn = 7.2×103Mw/Mn = 1.04,自制[7];四氢呋喃(THF)、 DMF、碳酸氢钠、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)、肉桂醇(CA)、二甲基亚砜(DMSO):购自上海泰坦科技有限公司,直接使用;二氯乙酸(DCA):w=99 %,Sigma-Aldrich上海贸易有限公司;氢溴酸醋酸溶液:w=33%,上海百灵威技术有限公司;实验用超纯水:电阻率:18.2 MΩ cm,Millipore超纯水系统制备;透析袋:截留分子量为3 500,购自Serva Electrophoresis GmbH公司。

      核磁共振氢谱(1H-NMR):布鲁克公司 Avance 400 型核磁共振仪,CDCl3-CF3COOD(体积比为5/1)为溶剂,TMS为内标物;红外吸收光谱(FT-IR):美国热电Nicolet 5700型傅里叶变换红外光谱仪,采用涂膜制样,测试范围是4000~400 cm−1;紫外-可见光光谱(UV-Vis):美国瓦里安公司Lambda 950型紫外-可见光分光光度计;扫描电子显微镜(SEM):日本日立公司(Hitachi)S-4800型场发射扫描电镜,加速电压为10 kV,将样品溶液滴于硅片上,自然风干,测试前喷铂处理;透射电子显微镜(TEM):日本电子公司(JEOL)JEM-1400型透射电子显微镜,加速电压100 kV,将样品滴于铜网上,自然风干。

    • 将0.3 g PBLG-b-PEG嵌段共聚物置于100 mL的单口烧瓶中,加入10 mL二氯乙酸,室温下磁力搅拌2 h。然后,取0.3 mL氢溴酸醋酸溶液加入到单口烧瓶中。磁力搅拌20 min后,加入饱和的碳酸氢钠溶液,将反应液pH调至弱酸性。经透析、冷冻干燥后得到白色固体粉末(P(BLG/LGA)-b-PEG)。

    • 取0.15 g P(BLG/LGA)-b-PEG嵌段共聚物于干燥洁净的茄型反应瓶中,以5 mL无水DMSO溶解。加入2 mL EDC·HCl(0.055 g/mL)和2 mL DMAP(0.025 g/mL)的DMSO溶液,磁力搅拌30 min后,加入2 mL CA(0.08 g/mL)的DMSO溶液。室温下反应3 d,然后,经乙醇、纯水透析后,冷冻干燥得到白色粉末状固体(P(BLG/CLG)-b-PEG),反应流程如图1所示。

      图  1  可光交联的P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物的合成过程

      Figure 1.  Synthetic route of photo-crosslinkable P(BLG/CLG)-b-PEG block copolymer

    • 将P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物和PS均聚物分别以THF-DMF混合溶剂(体积比为5/5)溶解,质量浓度均为0.5 g/L。取P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物溶液2 mL与PS均聚物溶液2 mL混合,振荡过夜。在磁力搅拌下,以0.12 mL/min的速率滴加1.2 mL超纯水;通过纯水透析3 d,得到约6.4 mL“毛线球”状组装体水溶液。

    • 将P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物和PBLG均聚物分别以THF-DMF混合溶剂(体积比为3/7)溶解,质量浓度均为0.2 g/L。取P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物溶液2.4 mL与PBLG均聚物溶液1.6 mL混合,振荡过夜。在磁力搅拌下,以0.12 mL/min的速率滴加1.2 mL超纯水;通过纯水透析3 d,得到约6.8 mL“螺旋棒”状组装体水溶液。

    • 将得到的“毛线球”组装体水溶液(约6.4 mL)浓缩至2 mL,并加入到石英试管中,置于波长λ = 254 nm的紫外光下照射1 h(试管与紫外灯源之间的距离约15 cm),交联球状VLPs的壳结构。取1 mL组装体水溶液加入到8 mL DMF中,室温下搅拌15 min,以除去组装体内部的均聚物内核,得到9 mL球状HVLPs母液。

      “螺旋棒”状组装体水溶液制备HVLPs过程与上述操作类似。

    • 向7个样品瓶中各加入0.9 mL球状HVLPs母液(经计算,HVLPs的质量约50 μg),再依次加入质量浓度为0.2 g/L 的DOX的DMF溶液0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mL和1.2 mL。分别再补加适量DMF至各个样品瓶中,使溶液的总体积为2.1 mL,室温下搅拌4 h,然后以0.04 mL/min的速率向各个样品瓶中滴加0.4 mL纯水,制备负载DOX的VLPs。此时,溶液中含有2 mL DMF和0.5 mL水。

      将负载DOX的VLPs溶液以孔径为0.20 μm的聚四氟乙烯滤膜过滤,除去VLPs,得到各个样品的滤液。通过紫外分光光度计测定各滤液中游离的DOX量,计算出负载到VLPs中的DOX质量。

    • 取0.9 mL球状HVLPs母液加入到棕色样品瓶中,加入质量浓度为0.2 g/L的DOX的DMF溶液1.2 mL。室温下搅拌4 h,然后以0.04 mL/min的速率滴加0.4 mL纯水,得到负载DOX的VLPs。将负载DOX的VLPs溶液装入透析袋中,用超纯水透析3 d,得到负载DOX的VLPs水溶液。

      将负载DOX的VLPs水溶液转移至装有40 mL磷酸盐(PBS)缓冲溶液(pH = 7.4)的烧杯中,37 ℃下振荡,振荡频率100 r/min。定时取5 mL样品,并补充5 mL PBS缓冲液。以紫外分光光度计测定样品溶液在485 nm的吸光度,根据DOX在磷酸缓冲液(pH = 7.4)中的标准曲线,计算出相对应的药物累计释放量。

    • 将P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物以THF-DMF混合溶剂(体积比为3/7)溶解,质量浓度为0.2 g/L。取该溶液20 mL,以0.6 mL/min的速率滴加6 mL的超纯水,经透析后得到P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物的聚集体水溶液。

      将P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物的聚集体水溶液置于波长λ= 254 nm的紫外光下照射,每隔一段时间取样,用紫外分光光度计测定样品在200~400 nm的吸收光谱,表征其交联反应程度。

    • (1)DOX标准曲线测定:以DMF-H2O(体积比4/1)为溶剂条件,分别配置质量浓度为25、50、75、100、125 μg/mL的DOX溶液,使用紫外分光光度计测定各个溶液在485 nm处吸光度,经拟合得到DOX吸光度A和质量浓度ρ,μg/mL关系的标准曲线:ρ= 53.713 06 AR2 = 0.999 3。以PBS为溶剂条件,得到DOX在pH = 7.4的PBS缓冲液中的标准曲线:ρ= 64.614 19 AR2 = 0.999 9。(2)VLPs相对载药量和包封率的计算:用紫外分光光度计测定各个滤液在485 nm处的吸光度,得到游离的DOX质量,以DOX投入量与游离量的差值,推出载入VLPs的DOX质量。通过公式(1)计算出负载于VLPs的DOX质量(ms),根据公式(2)计算VLPs的相对载药量(D),根据公式(3)计算药物的包封率(N):

      $ {m_{\rm{s}}}=\left( {1 - \frac{{{A_{\rm{s}}}}}{{{A_{\rm{0}}}}}} \right){\rm{x}}\;{m_{\rm{0}}} $

      $ D = \frac{{{m_{\rm{s}}}}}{{{m_{\rm{p}}}}}{\rm{x}}\;{\rm{100{\text%} }} $

      $ N = \frac{{{m_{\rm{s}}}}}{{{m_0}}}{\rm{x}}\;100{\text%} $

      其中:A0为由标准曲线计算出DOX对应浓度的吸光度;As为各个滤液的吸光度;m0为初始DOX投入质量;ms为载入HVLPs中的DOX质量;mp为球状VLPs的质量(50 μg)。

    • 根据不同时间DOX的累计释放量与载入HVLPs中的DOX质量的比值,得到药物释放百分比,药物释放百分比(R)定义为:

      $ R = \frac{{{m_t}}}{{{m_{\rm{s}}}}}{\rm{x}}\;100{\text%} $

      其中:mtt时刻的药物累计释放量。

    • 图2为PBLG-b-PEG和P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物的1H-NMR谱图。P(BLG/CLG)-b-PEG的1H-NMR谱图中在δ = 6.70(e)、6.31(f)处出现了新吸收峰,这两处吸收峰分别对应于肉桂酰氧基上的碳碳双键(―CH=CH―)的质子。此结果表明肉桂醇成功接枝到共聚物上。根据P(BLG/CLG)-b-PEG 5.05(c)与2.42(b)处的峰面积比值计算出脱苄基率为10.0 %;再根据δ = 6.70(e)、6.31(f)与δ = 2.42(b)处的峰面积比值,计算出肉桂酰氧基的接枝率为10.0 %,表明酯化完全。

      图  2  样品的1H-NMR谱图

      Figure 2.  1H-NMR spectra of samples

    • 经波长254 nm的紫外光照射后,肉桂酰氧基上的C=C双键之间发生[2 + 2]环加成反应[19-21],实现了聚肽链与链之间交联(图3(a))。P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物的紫外光谱如图3(b)所示,由图可见,随着紫外光照射时间延长,284 nm和293 nm处归属于肉桂酰氧基上C=C双键的特征吸收峰逐渐降低,说明C=C双键相互之间不断发生环加成反应,使体系中的C=C双键不断减少。

      图  3  P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物[2+2]环加成反应示意图(a);P(BLG/CLG)-b-PEG聚集体的紫外光照射时间-紫外吸收光谱图(b);At/A0与紫外光照射时间的关系图(c);P(BLG/CLG)-b-PEG紫外光照射前后红外光谱图(紫外光照射40 min)(d);P(BLG/CLG)-b-PEG交联前后的1H-NMR谱图(紫外光照射40 min)(e)

      Figure 3.  Schematic illustration of [2 + 2] cycloaddition reaction of P(BLG/CLG)-b-PEG copolymer(a); UV-Vis spectra of aqueous solution of P(BLG/CLG)-b-PEG aggregates subjected to UV-irradiation at 254 nm as a function of irradiation time(b); Plot of At/A0 at 293 nm against irradiation time(c); FT-IR(d)and 1H-NMR(e)spectra of P(BLG/CLG)-b-PEG before and after UV-irradiation for 40 min

      图3中,A0为未经紫外光照射,紫外吸收光谱中293 nm处的吸收值,Att时刻紫外吸收光谱中293 nm处的吸收值。如图3(c)所示,P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物环加成反应过程,0~40 min,At/A0迅速降低,表明环加成反应迅速进行;当紫外光照射时间超过60 min后,At/A0就趋于一个稳定值,表明C=C双键已经基本反应完全。

      C=C双键的交联反应也由红外光谱得到证实,如图3(d)所示,965 cm−1处为肉桂酰氧基上的=C―H的弯曲振动峰,1 650 cm−1处为C=C的伸缩振动峰。交联后,965 cm-1处肉桂酰氧基上=C―H的弯曲振动吸收峰消失,这是由于紫外光照射后,PBLG嵌段侧基上C=C的环加成反应,使肉桂酰氧基上的=C―H消失导致;而1 650 cm−1处的峰稍有减弱,是由于1 650 cm−1处肉桂酰氧基上C=C的伸缩振动峰与PBLG链段的α-螺旋构象峰重叠[22]

      图3(e)为交联前后的P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物1H-NMR谱图。由图可见,交联后,δ = 6.70、6.31处肉桂酰氧基上的―CH=CH―质子吸收峰均消失,这也进一步证实了PBLG嵌段侧基上的C=C双键发生环加成反应。此外,由于环加成反应导致高分子链间发生交联,使交联的共聚物在氘代试剂中的溶解性变差,导致侧链上的δ = 2.42、2.10、1.91的质子吸收峰以及主链上δ = 4.60处的质子吸收峰出峰变得不明显。

    • P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物与PS均聚物共混自组装得到表面具有条纹的球状VLPs(图4(a)),经254 nm的紫外光照射后,得到壳结构固定的球状VLPs(图4(b))。将球状VLPs水溶液加入到DMF中,浸泡15 min后,得到了球状HVLPs(图4(c))。从SEM图可以看出,聚集体结构呈塌缩态且表面为褶皱状,表明球状VLPs的PS均聚物内核已被去除。TEM观察也证实了其中空结构,如图4(d)所示,在TEM图中聚集体呈纵横交错的明暗条纹状态,衬度差异明显。这是由于球状HVLPs壳结构中的条纹结构相互叠加导致。

      图  4  SEM表征P(BLG/CLG)-b-PEG/均聚物共混自组装形成的聚集体形貌:交联前(a)后(b)球状VLPs;球状HVLPs的SEM图(c)和TEM图(d);交联前(e)后(f)棒状VLPs

      Figure 4.  SEM images of aggregates formed by P(BLG/CLG)-b-PEG/homopolymer mixtures: Spherical VLPs before(a)and after(b)UV-irradiation; Typical SEM(c)and TEM(d)images of spherical HVLPs; Rod-like VLPs before(e)and after(f)UV-irradiation

      P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物与PBLG均聚物共混自组装得到螺旋棒状VLPs(图4(e)),经紫外光照射后,得到壳结构固定的棒状VLPs(图4(f))。按照球状VLPs的制备流程,将棒状VLPs的聚集体水溶液加入到大量DMF中,发现DMF不能溶解棒状VLPs的PBLG内核,无法制备出棒状HVLPs。分析原因如下:(1)相较于“毛线球”聚集体的内核PS均聚物,螺旋棒的内核PBLG均聚物分子链为刚性链,运动能力较差;(2)构成“毛线球”聚集体内核的PS均聚物分子量较小,经DMF溶解后,易穿过交联的壳结构,而构成螺旋棒内核的PBLG均聚物分子量较大,穿过壳结构较难。

    • 以DOX为模型药物,研究了球状HVLPs的载药性能。向球状HVLPs和DOX的混合溶液中加水后,疏水药物DOX载入到HVLPs内。DOX在DMF-H2O(体积比为4/1)溶剂中的最大吸收波长为485 nm处(图5(a));在此条件下,DOX吸光度和质量浓度关系的标准曲线如图5(b)所示。

      图  5  DOX在DMF-H2O(体积比为4/1)溶剂中的紫外吸收光谱(a);DOX在DMF-H2O(体积比为4/1)溶剂中吸光度和质量浓度关系的标准曲线(485 nm)(b);VLPs的相对载药量和包封率与投药量的关系曲线(c);在fDOX = 0.83条件下制得的载药VLPs的药物缓释曲线(d)

      Figure 5.  UV-Vis spectrum of DOX in DMF-H2O(Volume ratio 4/1)(a); Concentration-absorbance profile of DOX in DMF-H2O(Volume ratio 4/1)(b); Plots of drug-loading content and encapsulation percentage of DOX-loaded VLPs as a function of fDOX(c); Drug release of DOX from drug-loaded VLPs prepared with fDOX = 0.83(d)

      利用拟合的标准曲线计算了VLPs的相对载药量和包封率与相对投药量之间的关系。相对投药量以DOX的质量与DOX和球状HVLPs总质量的比值(fDOX)来表示。本文中,根据DOX与VLPs的质量,fDOX为0.09~0.83。如图5(c)所示,随着fDOX的增大,VLPs的相对载药量也会明显增大,而包封率会降低;当fDOX = 0.83时,VLPs的相对载药量达到230%,包封率达到48%。

      fDOX= 0.83条件下制备得到的载药VLPs的药物释放性能如图5(d)所示。载药VLPs对DOX具有较好的缓释效果,在37 ℃,pH = 7.4条件下,0~12 h内VLPs的药物释放速率较快;而在12 h以后,VLPs的药物释放速率逐渐降低,72 h的累计药物释放量达到80%。

    • (1)制备出了可光交联的P(BLG/CLG)-b-PEG嵌段共聚物,以P(BLG/CLG)-b-PEG分别与PBLG、PS共混自组装,制备出具有表面纳米结构的核-壳型棒状和球状VLPs。

      (2)通过有机溶剂溶解可以除去球状VLPs的PS均聚物内核,得到球状HVLPs;有机溶剂不能溶解除去棒状VLPs的PBLG均聚物内核。

      (3)球状HVLPs对DOX具有良好的负载能力,相对载药量可以达到230%;载药的VLPs具有一定的药物缓释性能,72 h的药物累计释放量达到80%。

参考文献 (22)

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